生物专题1-生物透​射制样简明步骤

一缕半夏微光c丶失效分析 2023-09-01 11:06:23 338阅读 举报

1. 取材
 组织块小于1立方毫米。
2. 前固定
 2.5%戊二醛,磷酸缓冲液配制(0.1M,pH7.2-7.4)固定2小时以上。
3. 清洗
 用0.1M磷酸缓冲液漂洗,3-4次,每次15分钟
4. 后固定
 1%锇酸固定,磷酸缓冲液配制(0.1M,pH7.2-7.4),2-3小时,动物2小时,植物4小时。
5. 清洗
 用0.1M磷酸缓冲液漂洗,3-4次,每次15分钟以上在4°C冰箱内进行
6. 梯度脱水
 30%乙醇15-20分
 50%乙醇15-20分
 70%乙醇(可加醋酸铀过夜)15-20分
 90%乙醇15-20分
 95%乙醇15-20分
 100%乙醇,两次15-20分
 100%乙醇:100%丙酮(1:1)15-20分
 100%丙酮(加分子筛或无水Na2SO4),2次,每次,15-20分
7. 树脂渗透
 100%丙酮:Epon812=2:1,室温3-4小时
 100%丙酮:Epon812=1:2,室温3-4小时
 纯包埋剂,2次,每次室温3-4小时
8. 包埋
 利用包埋模具包埋,如需定位,注意方向。
9. 固化
 37°C烘箱内12小时
 45°C烘箱内12小时
 60°C烘箱内48小时
10. 超薄切片
 超薄切片机切片,厚度50-70nm
11. 铅铀双染色
 2%醋酸双氧铀染色10-30分钟
 柠檬酸铅染色5-15分钟
12. 电镜观察

版权声明:
作者:一缕半夏微光c丶
链接:https://www.cycxic.com/p/1574bc310fbdd1.html
来源:失效分析
文章版权归作者所有,未经允许请勿转载,若此文章存在违规行为,您可以点击 “举报”


登录 后发表评论
0条评论
还没有人评论过~
请教下大家,DPPM怎么算?
问答 1 位搬砖人回复
请教下,t-scan和c-scan的差异?
问答 1 位搬砖人回复
请问蓝色圈出来的是什么器件?
问答 1 位搬砖人回复
有人知道这是什么嘛?
问答 1 位搬砖人回复